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維多利亞藍彈力纖維染色試劑盒200ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
維多利亞藍彈力纖維染色試劑盒200ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2
EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H446細胞,人小細胞肺癌細胞 大鼠神經膠質瘤細胞,C6細胞 CM-H111人成骨細胞*培養基100mL
小鼠心肌細胞MCM
Promocell C-27438 Adipocyte Nutrition Medium, 脂肪細胞營養培養基(即用型) 500ml
豬靜脈血管內皮細胞;ZYM-SVEC01
HFE2 Others Human 人 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0153MDBK(牛腎細胞)5×106cells/瓶×2
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細胞 卵巢癌細胞,Coc2細胞 HEC-1-B(子宮內膜腺癌細胞)
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
MIF Others Mouse 小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肝內膽管上皮細胞cDNAHIBEpiC cDNA
16HBE 人支氣管上皮細胞
CL-0263BGC-803(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞
Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33 人腎小球內皮細胞*培養基 100mL
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鋅指蛋白644(ZNF644)免疫試劑盒 Human ZNF644 ELISA Kit
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒 紫外分光光度法 10管/9樣
Ratmalondialchehyche,MDAELISA試劑盒大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanHelicobacterpyloricytotoxin-associatedgeneAproteinIgG,HP-CagA-IgGELISA試劑盒人幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanleukotrieneE4,LT-E4ELISAKit人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠白介素27(IL-27)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human deoxypyridinoline crosslinks (DPD) ELISA Kit 人脫氧膠原吡啶交聯(DPD)ELISA試劑盒
HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISA試劑盒人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
重組腺病毒構建試劑盒1套
Humansolublecytokinereceptor,sCKRELISAKit人可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
維多利亞藍彈力纖維染色試劑盒200ml使用說明書人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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