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纖維素染色試劑盒(Gram甲紫法)3X50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:44:06瀏覽次數:143次

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纖維素染色試劑盒(Gram甲紫法)3X50ml實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

纖維素染色試劑盒(Gram甲紫法)3X50ml實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
纖維素染色試劑盒(Gram甲紫法)3X50ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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PANC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照)

DMS153細胞,人小細胞肺癌細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞,PC12細胞 CM-H127人晶狀體上皮細胞*培養基100mL

小鼠紋狀體神經元MN-s

Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細胞培養基(即用型) 100ml
CM-R101大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養基100mL

HEXB Others Human Hexosaminidase B / HEXB 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠小腦星形膠質細胞MA-c

G-7細胞,小鼠骨骼肌肌肉母瘤細胞 人腎癌細胞,GRC-1細胞 人小氣道上皮細胞HSAEpiC

小耳豬腎細胞;SEPfk

OPCML Others Human OPCML 人細胞裂解液 (陽性對照)
NRG1 Others Human NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照)

人肝內膽管上皮細胞裂解物HIBEpiCL

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MC53細胞,小鼠腎系膜細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細胞;F81

EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標簽)

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人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒 Human h-FABP ELISA Kit

脂肪酸合成酶(FAS)測試盒 紫外分光光度法 50/48

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HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISA試劑盒人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T

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小鼠白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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