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磷脂鐵蘇木素(FeH)染色試劑盒3×100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:50:03瀏覽次數(shù):235次

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磷脂鐵蘇木素(FeH)染色試劑盒3×100ml實驗方法RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小型豬腎細(xì)胞;MPK

NRN1L Others Human NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

H125細(xì)胞,人肺癌細(xì)胞 小鼠脂肪細(xì)胞,L13T3細(xì)胞 CM-R111大鼠雪旺氏細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞HCSMC

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000ml

磷脂鐵蘇木素(FeH)染色試劑盒3×100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
磷脂鐵蘇木素(FeH)染色試劑盒3×100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
磷脂鐵蘇木素(FeH)染色試劑盒3×100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

A431 人表皮癌細(xì)胞

PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細(xì)胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

RSPO3 Protein Human 重組人 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標(biāo)簽)

人骨骼肌細(xì)胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse
人表皮黑色素細(xì)胞-深色素(HEM)( 5×105 )

人細(xì)胞;C-33A

rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞

T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E 大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

P388 小鼠白血病細(xì)胞

SPINT1 Others Human SPINT1 / HAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠Smad同源物2(Smad2)ELISA試劑盒 ,英文名: Smad2 ELISA Kit

人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA檢測試劑盒Humancardiactroponin,cTn-ELISAKit 96T/48T

大鼠*(cAMP)免疫試劑盒 Rat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit

英文名稱Ratanti-alpha-FodrinIgG/IgAELISAKit大鼠alpha-Fodrin抗體IgG/IgA規(guī)格:96T/48T

裂解液Ⅴ紅細(xì)胞裂解液/白細(xì)胞分離

ELISAKitGDI人鳥苷酸解離抑制因子規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human advanced glycation end product receptor (RAGE/AGER) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒

HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OISAKit N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCaspase-9,Casp-9ELISA試劑盒人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN28品系基因檢測試劑盒20

humansimilartoRIKENcDNA3110050K21geneELISAKit人類似RIKENcDNA3110050K21基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷脂鐵蘇木素(FeH)染色試劑盒3×100ml實驗方法人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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