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醋酸洋紅染色液50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:51:54瀏覽次數:376次

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公司供應的醋酸洋紅染色液50ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

醋酸洋紅染色液50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
SCaBER(人膀胱鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2

犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgR

TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細胞裂解液 (陽性對照)

95-D細胞,人高轉移肺癌細胞 轉血小板基因倉鼠卵巢細胞,CHO-pt細胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細胞*培養基100mL

人真皮微血管內皮細胞-HDMEC

Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml
WM35, 人黑色素瘤細胞

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2

豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5 大鼠肝細胞,BRL 3A細胞 NBLE細胞,新生牛眼晶體上皮細胞

人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1

HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD81 Others Human CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人細胞;Hela P10s-11F

MN-s, 小鼠紋狀體神經元

ZR-75-1細胞,導管癌細胞 人絨癌細胞耐藥株,JEG-3/VP16細胞 人氣管平滑肌細胞RNAHTSMC miRNA5 μg

恒河猴腎細胞;MMK3

EPHB6 Others Human EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit

*還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50/48

Ratmatrixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human P-selectin (omentin) ELISA Kit 人網膜素(omentin)ELISA試劑盒

HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit 人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCathepsinK,cath-KELISA試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒規格:96T/48T

轉基因油菜(canola)RF3品系基因檢測試劑盒20

Humansignalrecognizationparticleantibody,SRPELISAKit人抗信號識別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法人*(FK506)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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