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甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:56:24瀏覽次數(shù):260次

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公司供應的甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)100ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
SK-OV-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]

EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照)

MRC-5細胞,人胚肺細胞 大鼠肺上皮Ⅱ型細胞,RLE-6TN細胞 T-109B彈性蛋白酶(100mL酶解緩沖液)10mL

胰腺導管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HUVEC-c Growth Medium 2 pooled 500,000cells 肺大靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CM-R087大鼠軟骨細胞*培養(yǎng)基100mL

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠海馬趾星形膠質細胞MA-h

猴腎細胞;Vero IgCD4 人巨核細胞白血病,CHRF細胞 SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細胞)

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928

GFRA2 Others Mouse 小鼠 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人細胞裂解液 (陽性對照)
人成纖維細胞(HMF)(5×105)

人骨肉瘤細胞;HOS

CM-H112人脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠漿細胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓 Rattus

EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠基質金屬蛋白酶19(MMP19)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP19 ELISA Kit

人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA檢測試劑盒Humanadenosinedeaminase,ADAELISAKit 96T/48T

大鼠纖連蛋白(FN)免疫試劑盒 Rat Fibronectin,FN ELISA Kit

英文名稱RatangiotensionIELISAKit大鼠血管緊張素I(AngI)規(guī)格:96T/48T

果菜類植酸比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKiongin人延伸蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人維生素C(VC)ELISA試劑盒

Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調素(CAM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanchemerinELISA試劑盒人chemerinELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉基因玉米NK603品系基因檢測試劑盒20

HumanserineproteasePRSSELISAKit人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)100ml實驗方法人上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人上腺素(EPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人上腺皮質抗體(ACA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人病蛋白(nephrin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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