黑色素脂褐素染色液(尼羅藍法)100ml免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
黑色素脂褐素染色液(尼羅藍法)100ml免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
黑色素脂褐素染色液(尼羅藍法)100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2

雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7

DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照)

GLC-82細胞，人肺腺癌細胞 轉S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA6細胞 CL-0050Caco-2(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HCAEC-c 人冠狀動脈內皮細胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養基100mL

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內皮細胞HUVEC

NCI-H226[H226]細胞，人肺癌細胞 人膀胱移行細胞癌細胞,T24細胞 人絨毛膜毛細血管內皮細胞HVCEC

鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu

MMP1 Others Human 人 MMP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠神經黑質細胞(MN-sn)(1×106)

人海馬趾神經元RNAHN-h miRNA5 μg

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1

小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1 小鼠關節軟骨細胞*培養基 100mL

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 Rattus

ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人腺病毒IgM(ADV-IgM)免疫試劑盒 Human adenovirus(ADV)antibody(IgM)ELISA kit

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣

Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規格：96T/48T

humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AbELISA試劑盒人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人維生素D受體(VD R)ELISA試劑盒

Humananti-zonapellucidaantibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

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紫外線處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20次

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黑色素脂褐素染色液(尼羅藍法)100ml免費代測人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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