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細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
固綠染色液(0.5%)100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
固綠染色液(0.5%)100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
固綠染色液(0.5%)100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
T-24(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP
EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
HPAEpiC細胞,人肺泡上皮細胞 小鼠腎小球系膜細胞,MES-13細胞 CL-0090Hacat(人永生化角質形成細胞)5×106cells/瓶×2
神經元細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HPMEC-c 人肺微血管內皮細胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
上皮細胞培養基MEpiCM-prf
HA Others H7N2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910
大鼠氣管上皮細胞;RTE 慢性髓原白血病細胞,K-562細胞 P3X63Ag8.653細胞,小鼠骨髓瘤細胞
ACHN, 人腎細胞腺癌細胞 Human
CRTAM Others Human 人 CRTAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脂肪間充質干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)
人紅系白血病細胞;TF-1
CM-R024大鼠淋巴成纖維細胞*培養基100mL
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1 小鼠小腸血管內皮細胞*培養基 100mL
CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse
SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺病毒3(ADV3)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human ADV3 IgG ELISA Kit
丙二醛(MDA)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA試劑盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanL-SelectinELISAKit人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanChorionicGonadotrophinβ,β-CGELISA試劑盒人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次
HumanSalusinαELISAKit人Salusin-αELISA試劑盒規格:96T/48T
固綠染色液(0.5%)100ml實驗方法人相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人皰疹抗體(HG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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