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地衣紅染色液(1%)50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-07 11:25:59瀏覽次數:145次

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地衣紅染色液(1%)50ml實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

地衣紅染色液(1%)50ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
地衣紅染色液(1%)50ml實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
U-937(人組織細胞淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]

HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細胞裂解液 (陽性對照)

Ketr-3細胞,人腎癌細胞 大鼠鼻咽癌細胞,FAT細胞 CL-0186PIEC(豬髖動脈內皮細胞 )5×106cells/瓶×2

結腸平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HPlEpC-c 人類胎盤細胞上皮細胞 500,000cells 食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
滑膜細胞培養基SM-prf

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉化的人B淋巴細胞(彝族);HYL

大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3 結腸腺癌細胞,CW-2細胞 R1610細胞,中國倉鼠倉鼠肺細胞

BPH-1, 人前列腺增生細胞 Human

ICOSLG Others Human ICOSLG / B7-H2 / ICOSL / CD275 人細胞裂解液 (陽性對照)
PDGFRA Others Human PDGFRa / CD140a 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人急性單核細胞白血病細胞;THP-1

CL-0453TE-10(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]細胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纖維細胞)

人細胞;C-33A

BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

*降解產物(FDP)免疫試劑盒 Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒 可見分光光度法 50/48

RatMyosin,MYSELISA試劑盒大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanHerpesGestation,HGELISA試劑盒人皰疹抗體(HG)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanLymeIgGELISAKit人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒

HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanclusterin,CLUELISA試劑盒人凝聚素(CLU)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶3(HDAC3)活性比色法定量檢測試劑盒20

HumanReverseTri-iodothyronine,rT3ELISAKit人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
地衣紅染色液(1%)50ml實驗方法人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脾臟酪酸激酶(Syk)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人皮質/上腺(CORT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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