甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP

LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

786-O細(xì)胞，人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CMT93細(xì)胞 CL-0202Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

虹膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

NHEM.f-c M2 正常人表皮黑素細(xì)胞(NHEM)少年，M2培養(yǎng)液中培養(yǎng) 500,000cells 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
前列腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIC3細(xì)胞 EMT6細(xì)胞，小鼠細(xì)胞

人上皮細(xì)胞;MCF-10A

ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / ActrIIa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4

CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)

小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11

PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

*(Fb)免疫試劑盒 Human Fibrinogen,FB ELISA Kit

過氧化物酶(POD)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA試劑盒大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒

HumanFreeThyroxine,FT4ELISAKit 人游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancoagulationfactorⅡ,FⅡELISA試劑盒人*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶5(HDAC5)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanRetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit人*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費(fèi)代測人*Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝