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堿性亮綠染色液(2%)100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-07 11:26:48瀏覽次數:155次

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公司供應的堿性亮綠染色液(2%)100ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

堿性亮綠染色液(2%)100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
堿性亮綠染色液(2%)100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
堿性亮綠染色液(2%)100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2

人腦星形膠質母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

HBZY-1細胞,人腎小球髓母細胞 大鼠埀體瘤細胞,GH3細胞 CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2

冠狀動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

NHEM-c M2 adult 正常人表皮黑素細胞(NHEM)成年捐獻者(M2培養液中培養) 500,000cells 胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CM-H020人胰島β細胞*培養基100mL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

*(10mL 酶解緩沖液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構建穩定株)人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 (His 標簽)

人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細胞名稱 種屬
PPP3R1 Others Human PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60

CL-0437SF763(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2

細胞名稱 M-37細胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細胞)

人細胞;Hela P10s-11F

DLL4 Others Human DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒 Human TAFI ELISA Kit

銅藍蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50/24

RatNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanHerpessimplexvirusantibody,HSVAbELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVAb)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humanlymphocytefunctionassociatedantigen2,LFA-2ELISAKit人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat glucocorticoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒

Humanthyroxine,T4ELISAKit 人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancoagulationfactor,FELISA試劑盒人*Ⅲ(F)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組蛋白脫乙?;?/span>6(HDAC6)活性比色法定量檢測試劑盒20

Humanretinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人*誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
堿性亮綠染色液(2%)100ml實驗方法人*Ⅷ(F)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*Ⅲ(F)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*Ⅱ(F)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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