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細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
結晶紫水溶液(1%)100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
結晶紫水溶液(1%)100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
結晶紫水溶液(1%)100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
A875(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
人細胞;Hela
TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照)
HEK-293細胞,Ad5DNA轉化的胚腎細胞 恒河猴胚腎細胞,FRhK-4細胞 CL-0251MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞)5×106cells/瓶×2
II型肺泡上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HBEpC-c 人支氣管上皮細胞(HBEpC) 500,000cells 主動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
TE-1人食管癌細胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白 (His 標簽)
人毛發干細胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 Mouse
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人間充質干細胞-臍帶
人晶狀體上皮細胞RNAHLEpiC miRNA5 μg
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1 腦神經瘤細胞,Neuro-2A細胞 SH3細胞,小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞
人胚肺二倍體細胞;HL
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人纖連蛋白(FN)免疫試劑盒 Human Fibronectin,FN ELISA Kit
植物原花青素測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatneuropeptideY,NP-YELISA試劑盒大鼠神經肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanLysozyme,LZMELISAKit人*(LZM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠L苯丙酸解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat dehydroepiandrosterone S7 (DHEA-S7) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒
Humanestrogen,EELISAKit 人雌激素(E)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCollagenTypeⅢ,ColⅢELISA試劑盒人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanreceptortyrosinekinase,RTKsELISAKit人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒規格:96T/48T
結晶紫水溶液(1%)100ml實驗方法*M(IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*G4(IgG4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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