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結晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
結晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BC-009(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0920
ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
293FT細胞,表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞 大鼠肝細胞瘤,H4-II-E-C3細胞 CL-0324BT-20(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
原代內皮細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml
HTEpC-c 人類氣管上皮細胞(HTEpC) 500,000cells 人腦血管平滑肌細胞HBVSMC
甲狀腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]
倉鼠腎細胞;HL-1 骨髓瘤細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 3T3/Fas/com細胞,轉基因細胞
人胚腎細胞;293 [HEK-293]
ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠小神經膠質細胞(RM)(5×105)
人間充質干細胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg
非洲綠猴腎細胞;CV-1
KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細胞*培養基 100mL
細胞名稱 種屬
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人纖調蛋白(FMOD)免疫試劑盒 Human FMOD ELISA Kit
尿酸含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatNeurotrophin3,NT-3ELISA試劑盒大鼠神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISA試劑盒人高速泳動蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
HumanDihydrotestosterone,DHISAKit 人雙輕睪酮(DHT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCollagenaseIELISA試劑盒人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織5-羥色胺-N-乙?;D移酶(SerotoninN-Acetyltransferase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanReceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒規格:96T/48T
結晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書*A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*AFc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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