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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞染色>> *堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法

*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-07 11:35:51瀏覽次數(shù):138次

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公司供應(yīng)的*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
CNE-2Z(人鼻咽癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人羊膜細胞;WISH

HGF Others Cynomolgus 食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照)

2V6.11細胞,人胚腎細胞 小鼠骨髓瘤細胞,P3X63Ag8.653細胞 CL-0405NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

THP-1人單核白血病細胞

hMNC-CB-c single donorultra-pure 臍帶血來源的人類單核細胞 人腎小管上皮細胞HRPTEpiC
人結(jié)腸微血管內(nèi)皮細胞HCoMEC

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

KMB 人胚肺成纖維樣細胞

CM-H091人大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細胞裂解液 (陽性對照)

人結(jié)腸平滑肌細胞RNAHCSMC miRNA5 μg

GIST 人胃腸道間質(zhì)瘤細胞

CL-0434SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2

人少突膠質(zhì)細胞

人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA 人直結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒 Human SOCS-3 ELISA Kit

總巰基測試盒 可見分光光度法 50/24

Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanhistatin5,HTN5ELISA試劑盒人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat vitamin E (VE) ELISA Kit 大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒

Human5-Hydroxytryptamine,5HISAKit 5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISA試劑盒人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織AURORA-B激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanPyridinoline,PYDELISAKit人吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實驗方法人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人磷酸肌酸激酶(CPK)Elisa試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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