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微絲染色試劑盒(R250法)100ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
微絲染色試劑盒(R250法)100ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2
人臍動脈內皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg
NTRK1 Others Mouse 小鼠 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
G401細胞,人腎癌Wilms細胞 大鼠垂體細胞,RPC細胞 CL-0462UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
CSC, 小鼠心肌細胞
hCD133+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD133+祖細胞(hCD133+-CB),單一捐獻者 100000 大鼠垂體細胞RPC
人肺動脈成纖維細胞HPAF
HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02
黑化大家鼠肺成纖維細胞;NRm 管癌細胞,BT549細胞 MA-782細胞,鼠癌細胞系
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 Rattus
EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細胞裂解液 (陽性對照)
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細胞裂解液 (陽性對照)
人結直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM]
人肝動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
P815細胞,小鼠肥大細胞癌細胞 V79-4(中國倉鼠肺細胞) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽)
QGY-7701(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠海藻糖酶(TREH)ELISA試劑盒 ,英文名: TREH ELISA Kit
人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA檢測試劑盒HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 96T/48T
大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)免疫試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit
英文名稱RatAquaporin5ELISAKit大鼠水通道蛋白5(AQP5)規格:96T/48T
化妝品甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次
ELISAKitaGT人血管緊張素原規格:48T/96T
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 大鼠細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒
HumanEstradiolreceptor,ERELISAKit 人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancomplementfactorD,CFDELISA試劑盒人補體因子D(CFD)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織BTK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPseudomonasExotoxinA,PEAELISAKit人綠膿桿菌外毒素A(PEA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
微絲染色試劑盒(R250法)100ml售后服務人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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