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堿性固綠染色試劑盒100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-07 11:39:50瀏覽次數:167次

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堿性固綠染色試劑盒100ml實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

堿性固綠染色試劑盒100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
堿性固綠染色試劑盒100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
堿性固綠染色試劑盒100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
HELF(人胚肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2

人心肝成纖維細胞RNAHCF miRNA5 μg

SELPLG Others Human PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細胞裂解液 (陽性對照)

EJ細胞,人膀胱癌細胞 小鼠成纖維細胞系,McCoy細胞 人少突膠質細胞

人臍動脈平滑肌細胞

hMSC-BM-c 人類骨髓間質干細胞(hMSC-BM) 500,000cells 小鼠腦膜細胞MMenC
牛腎細胞;MDBK

GUCA1A Others Human GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)

團頭魴尾鰭細胞;WCF 人卵巢畸胎瘤細胞,PA-1細胞 SK-OV-3(卵巢癌細胞)

人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1

EFNA3 Others Human EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人細胞裂解液 (陽性對照)
FAM3C Others Human FAM3C / ILEI 人細胞裂解液 (陽性對照)

人結直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18]

CM-R018大鼠頜下腺上皮細胞*培養基100mL

HGC-27細胞,人未分化胃癌細胞 人神經母細胞瘤細胞,BE(2)-M17細胞 恒河猴腎細胞;RM-1

CT26.WT(小鼠結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CA10 Others Human CA10 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細胞色素c氧化酶亞基5B,線粒體(COX5B)免疫試劑盒 Human Cytochrome c oxidase subunit 5B,mitochondrial(COX5B)ELISA kit

AMP含量測試盒 高效液相色譜法 50/48

Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISA試劑盒大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISA試劑盒人溶酶體相關膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humanmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/HLA-ELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC/HLA-)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat cytochrome P450 (CYP450) ELISA Kit 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒

Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanComplementfragment3b,C3bELISA試劑盒人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織EINKINASE1δ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
堿性固綠染色試劑盒100ml實驗方法人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人可溶性凋亡相關因子配體(sFASL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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