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軟骨染色試劑盒150ml使用說明書

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更新時間:2017-07-07 11:40:23瀏覽次數:148次

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軟骨染色試劑盒150ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
軟骨染色試劑盒150ml使用說明書注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Ishikawa(人子宮內膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人膀胱基質成纖維細胞RNAHBdSF miRNA5 μg

SIGIRR Others Human SIGIRR / TIR8 人細胞裂解液 (陽性對照)

T24細胞,人膀胱移行細胞癌細胞 大鼠肝癌細胞(wistar 大鼠),CBRH7919細胞 RN-c, 大鼠皮質神經元

CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli細胞)5×106cells/瓶×2

hPC-PL-c 人類胎盤周細胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細胞MMa
人肺微血管內皮細胞cDNAHPMEC cDNA

GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

TE-11細胞,食管癌細胞 人食管癌細胞,CaEs-17細胞 大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2

ICAM1 Others Human ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照)
PFKFB3 Others Human PFK2 / PFKFB3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人結直腸腺癌細胞;HT-29

CM-R014大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養基100mL

GBC-SD, 人膽囊癌細胞 猴腎細胞,HepII細胞 TE 354.T(人皮膚基底細胞癌)

綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP

ADAM12 Others Human ADAM12 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細胞色素c氧化酶Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)免疫試劑盒 Human cytochrome c oxidase subunit VIa polypeptide 1,COX6A1 ELISA kit

谷酸合成酶(GOGAT)測試盒 紫外分光光度法 50/48

RatOncostatin-M,OSMELISA試劑盒大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanHyaluronicacid,HAELISA試劑盒人透明質酸(HA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanmalondialchehycheMDAELISAKit人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human non phosphorylated insulin like growth factor binding protein -1ELISA Kit 人未磷酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1ELISA試劑盒

HumanOrexinAELISAKit 人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanComplementfragment3c,C3cELISA試劑盒人補體7(C7)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織EINKINASE2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

Humanprothrombinfragment1+2F1+2ELISAKit人*原片段F1+2(F1+2)ELISA規格:96T/48T
軟骨染色試劑盒150ml使用說明書人可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人可溶性白細胞分化抗原28(sCD28)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人可溶性白細胞分化抗原21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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