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更新時間:2017-07-07 11:40:57瀏覽次數:160次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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M1(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照)
BIU-87細胞,人膀胱癌細胞 穩(wěn)定轉染了neor和LIF基因的STO細胞株,SNL細胞 CSC, 小鼠心肌細胞
CL-0440SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
NHEK adult single donor Pellet 正常人類表皮角質細胞團塊(捐獻者) > 1 mio.cells 小鼠腎小管上皮細胞MREpiC
視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
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SH-SY5Y細胞,神經母細胞瘤細胞 人膽囊癌細胞,GBC-SD細胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0
IL32 Others Human 人 Interleukin-32 / IL-32 (isoform alpha) 人細胞裂解液 (陽性對照)
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
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CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照)
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谷酸脫氫酶(GDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISA試劑盒大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHydrocortisone,HYDELISA試劑盒人(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠4羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat cyclin D1 (Cyclin-D1) ELISA Kit 大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒
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組織CDK2/CYCLINA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
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Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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