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細(xì)胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 1000T免費(fèi)代測

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人表皮黑色素細(xì)胞-中色素RNAHEM-m miRNA5 μg

VTCN1 Others Human B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

MCF-7(NEW)細(xì)胞,人癌細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞,ST2/o細(xì)胞 HET-1A, 人食管上皮細(xì)胞

CL-0416Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HFDPC Pellet 人卵泡毛細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM

細(xì)胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 1000T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 1000T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 1000T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

GPX7 Others Human GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮細(xì)胞 Mv.1.Lu (NBL-7) mink lung epithelial cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

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人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 )

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