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抑制與產生超氧陰離子自由基(O2-·)檢測試劑盒50T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
抑制與產生超氧陰離子自由基(O2-·)檢測試劑盒50T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
抑制與產生超氧陰離子自由基(O2-·)檢測試劑盒50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
WTRL1(大鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2
人膀胱平滑肌細胞cDNAHBdSMC cDNA
PGF Others Mouse 小鼠 PIGF / PLGF 人細胞裂解液 (陽性對照)
SK-BR-3細胞,人癌細胞 草魚腎細胞系,GIK細胞 肺大靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0253A-427(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
NHDF Pellet 正常人皮膚成纖維細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 硝基苯磷酸鈉(pNPP)磷酸酶檢測試劑盒pNPP
正常小鼠Sertoli細胞;TM4
GIF Others Human 人 Gastric intrinsic factor / GIF 人細胞裂解液 (陽性對照)
Saos-2人成骨肉瘤細胞 Saos-2 human osteosarcoma cells McCOY's 5A+15%FBS
SF126細胞,人腦瘤細胞 表皮葡萄球菌 人腎上皮細胞總RNAHREpiC tRNA
RK1(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2
FaDu(人咽鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0299NCI-H460(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)
PVRL1 Others Rat 大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人卵巢表層上皮細胞HOSEpiC
大鼠腸平滑肌細胞*培養基 100mL
HSF人皮膚成纖維細胞 HSF in human skin fibroblasts DMEM+10%FBS或者(進口的新生牛血清NCS)
EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 原代內皮細胞特制基礎培養基Many types of cells包裝:500/250/100ml
小鼠二級淋巴組織趨化因子(SLC)ELISA試劑盒 ,英文名: SLC ELISA Kit
人細胞毒素相關蛋白A(CagA)ELISA檢測試劑盒HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素F(PGF)免疫試劑盒 Rat Prostaglandin F,PGF ELISA Kit
英文名稱RattartRate-resistantacidphosphataseorm5bELISAKit大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)規格:96T/48T
簡易化學法冰凍切片抗原修復處理試劑盒50次
ELISAKitVDR人維生素D受體規格:48T/96T
豚鼠血清總補體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human hepatitis E virus IgG (HEV-IgG) ELISA Kit 人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒
Humanα-Endomorphin,α-EPELISAKit 人α-內*肽(α-EP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancross-linkedC-opeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISA試劑盒人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒20次
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit人前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
抑制與產生超氧陰離子自由基(O2-·)檢測試劑盒50T免費代測人抗弓形體IgM抗體(anti-toxIgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗弓形體IgG抗體(anti-toxIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗肝細胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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