一氧化氮檢測試劑盒-熒光100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
一氧化氮檢測試劑盒-熒光100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
一氧化氮檢測試劑盒-熒光100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞) 5×106cells/瓶×2

人前列腺上皮細胞裂解物HPEpiCL

SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細胞裂解液 (陽性對照)

1590細胞，人癌細胞系 小鼠淋巴瘤,EL-4細胞 腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CL-0148MADB106(大鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2

HMC Pellet 人冠狀動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L
615小鼠肺癌瘤株;HP615

GBP2 Others Human 人 GBP-2 / GBP2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人外周血白細胞*培養基 100mL

7WD10細胞，人APP基因轉染CHO細胞株 短小芽孢桿菌 犬胸腺細胞;cf2Th

CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白

NRK(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淋巴纖維細胞(MLF)(5×105)

人脈絡叢上皮細胞總RNAHCPEpiC tRNA

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]

小鼠腹水瘤細胞;S-180 小鼠角膜內皮細胞*培養基 100mL

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞 Human

LEPR Others Human 人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠心肌營養素1(CT-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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