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*檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
Dami(人巨核細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
CCCSCK
PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC 人細胞裂解液 (陽性對照)
8910PM細胞,人卵巢癌細胞 小鼠細胞,EMT6細胞 腎小管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0068COS-1(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)5×106cells/瓶×2
HTEpC Pellet 人類氣管上皮細胞團塊 > 1 mio.cells 人骨骼肌細胞cDNAHSkMC cDNA
大鼠星形膠質細胞RA
GAD1 Others Human 人 GAD67 / GAD1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
恒河猴腎細胞;RM-3
COS-1細胞,SV40轉化的非洲綠猴腎細胞 人大腸癌細胞,PA319細胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細胞*培養基100mL
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)
CD200 Others Human 人 CD200 / OX-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照)
人毛細胞HHDPC
KMML1 小白鼠肺成纖維樣細胞
CM-H075人腎足突細胞*培養基100mL
QBC-939, 人膽管癌細胞
人惡性多發性畸胎瘤細胞;NTERA-2 人小梁網細胞*培養基 100mL
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃內因子(GIF)免疫試劑盒 Human Gastric intrinsic factor,GIF ELISA kit
線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratpigmentepithelium-derivedfactor,PEDFELISA試劑盒大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanInfluenzavirusesIgG,FLUELISA試劑盒人流感病毒抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanMelanomaMarkerA,MART/Melan-AELISAKit人黑色素瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒規格:96T/48T
豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cytovillin / Ezrin protein (cytovillin/ezrin) ELISA Kit 人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA試劑盒
HumanSS-A/RoantibodyELISAKit 人抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclin-dependentkinase4,CDK-4ELISA試劑盒人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織GRK5激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanpolymyositis-sclerosisantibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit人抗多發性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
*檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書人甲酰甲(fMet)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人甲胺喋呤(MTX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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