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乙酰*檢測試劑盒-比色法100T實驗方法

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更新時間:2017-07-07 12:28:58瀏覽次數:182次

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乙酰*檢測試劑盒-比色法100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
乙酰*檢測試劑盒-比色法100T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
hFOB 1.19(SV40轉染人成骨細胞) 5×106cells/瓶×2

前脂肪細胞培養基PAM

DPEP2 Others Human DPEP2 / MBD-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

HCC 94細胞,人子宮鱗癌細胞(高分化) 小鼠骨髓瘤細胞,Fox-NY細胞 人雪旺細胞HSC

CM-M020小鼠上皮細胞*培養基100mL

hMo-PB single 人類外周血單核細胞團塊單一來源,超純 > 1 mio.cells 人小腦顆粒細胞RNAHCGC miRNA5 μg
人絨毛膜間充質基質細胞HCMSC

FLRT2 Others Human FLRT2 人細胞裂解液 (陽性對照)

HK-2 人腎近曲小管上皮細胞

CM-R027大鼠食管上皮細胞*培養基100mL

HuH-7人肝癌細胞

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1008 人神經少突起前質膠質細胞*培養基 100mL
NRN1L Others Human NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA

小鼠肝癌瘤株;H22

GBC-SD細胞,人膽囊癌細胞 APP基因轉染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質干細胞生長培養基DXF—無血清培養基 500ml
大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP ELISA Kit

人*(Pepsin)ELISA檢測試劑盒HumanPepsinELISAKit 96T/48T

鹿環磷酸鳥苷(cGMP)免疫試劑盒 Deer cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit

CLIAKitforPRL(Rabbitprolactin)ELISAKit兔子催乳素規格:48T/96T

石蠟切片組織CYP1A2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

ELISAKitCALD人鈣調結合蛋白規格:48T/96T
兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human fibromodulin (fibromodulin) ELISA Kit 人纖調蛋白(fibromodulin)ELISA試劑盒

humanImmunoglobulinE,IgEELISAKit *E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancytokininMB,CKMBELISA試劑盒人激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20

HumanPlaetassociatedantibody,PA-IgMELISAKit人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
乙酰*檢測試劑盒-比色法100T實驗方法人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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