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乙酰*酯酶檢測試劑盒-熒光法100T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
乙酰*酯酶檢測試劑盒-熒光法100T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
軟骨細胞培養基CM
TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細胞裂解液 (陽性對照)
C-33A細胞,人子細胞 兔主動脈平滑肌細胞,CCC-SMC-1細胞 人表皮角質細胞-胎兒HEK-f
CM-M012小鼠肺動脈成纖維細胞*培養基100mL
hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人類外周血CD14+單核細胞團塊單一來源,預選型 > 1 mio.cells 人脊髓星形膠質細胞RNAHA-sp miRNA5 μg
人小腦星形膠質細胞HA-c
FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
L6 大鼠成肌細胞
CM-H051人胎盤滋養層細胞*培養基100mL
SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞
人成骨肉瘤細胞;Saos-2 人脈絡膜微血管細胞*培養基 100mL
小鼠條紋神經細胞(MN-s)(1×106)
人腦血管平滑肌細胞RNAHBCSMC miRNA5 μg
狗腎細胞;Super Tube
小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養基 100mL
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒 ,英文名: MT/MLT ELISA Kit
人胃腸癌標志物CA199ELISA檢測試劑盒HumanGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit 96T/48T
倉鼠促卵泡素(FSH)免疫試劑盒 Hamster follicle stimulating hormone,FSH ELISA kit
CLIAKitforPVELISAKit魚卵黃高磷蛋白規格:48T/96T
石蠟切片脂質尼羅紅直接染色試劑盒50次
ELISAKitGSTpi人*硫轉移酶pi基因規格:48T/96T
兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human fibronectin (FN) ELISA Kit 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒
Humananti-streptolysinO,ASOELISAKit 人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISA試劑盒人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性檢測試劑盒20次
HumanplaetantibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規格:96T/48T
乙酰*酯酶檢測試劑盒-熒光法100T售后服務人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨骼肌受體酪酸激酶(MUSK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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