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全血丙酮酸檢測試劑盒100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
全血丙酮酸檢測試劑盒100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
全血丙酮酸檢測試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
IR983F(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
人絨毛間充質成纖維細胞HVMF
DPEP2 Others Human 人 DPEP2 / MBD-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
JEG-3-VP16-TNFa細胞,TNFa轉染耐VP16絨癌細胞 兔角膜前基質層成纖維細胞,RCFBF細胞 人微血管內皮細胞HMMEC
CM-R025大鼠外周血白細胞*培養基100mL
A2780(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H115人腦動脈血管內皮細胞*培養基100mL SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H110人皮膚肥大細胞*培養基100mL
5-8F, 人高轉移鼻咽癌細胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)
小鼠漿細胞瘤;MPC-11
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細胞裂解液 (陽性對照)
SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;MRC-5
HCCC-9810 人膽管細胞型肝癌細胞
293 Cells, low passage人胚腎細胞 293 Cells, low and passage in human embryo kidney cell 人胚腎細胞
LTA Protein Human 重組人 TNF-beta / TNFSF1 / Lymphotoxin alpha 蛋白
人臍帶動脈內皮細胞 (HUAEC)( 5×105 ) A549, 人肺癌細胞系 Human
小鼠前列腺酸性磷酸酶(ACP3)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP3 ELISA Kit
人維生素D受體(VDR)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminDReceptor,VDRELISAKit 96T/48T
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)免疫試劑盒 Rat lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
英文名稱HumanNF-kBELISAKit人NF-kB規格:96T/48T
動物組織羥*(hydroxyproline)比色法定量檢測試劑盒20次
α-bungarotoxin,α-BGISA試劑盒α-銀環蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒
HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性檢測試劑盒20次
HumanPlacentalalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
全血丙酮酸檢測試劑盒100T免費代測人副性天皰抗體(PNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人副甲狀旁腺激素相關肽(PTHrp)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人復制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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