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血清無機磷檢測試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
血清無機磷檢測試劑盒100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
KATO III(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人心臟微血管內皮細胞HCMEC
SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細胞裂解液 (陽性對照)
9L-B細胞,人前列腺癌細胞 小鼠癌細胞,CCC-Ca761-03細胞 大鼠淋巴成纖維細胞RLF
CM-R001大鼠肺微血管內皮細胞*培養基100mL
A549(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養基100mL 人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk
牛胚氣管細胞;EBTr (NBL-4)
FGFBP3 Others Human 人 FGFBP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0169NCI-N87(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2
Caco-2,人結直腸腺癌細胞 腺癌*耐藥株,MEF-7/Adr細胞 SiHa(子細胞)
人癌細胞;MDA-MB-468
TF Others Human 人 Transferrin / TF 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;MRC-5
人腎實質細胞*培養基 100mL
SRSV/3T3細胞,小鼠SRSV轉化的3T3細胞 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9402
CXCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽)
SHZ-88(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠維生素D2(VD2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素D3(VD3)免疫試劑盒 Human Vitamin D3,VD3 ELISA kit
酰基轉移酶(AAT)測試盒 可見分光光度法 10管/9樣
ratprolactin,PRLELISA試劑盒大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumaninterferonRegulatoryFactor,IRFELISA試劑盒人干擾素調節因子(IRF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
humanmixedlineagekinasedomain-like,MLKLELISAKit人混合系列蛋白激酶樣結構域(MLKL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thrombin activatable fibrinolysis inhibitor / thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI)ELISA Kit 人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒
HumanLDL-ICELISAKit 人低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandeoxyuridinetriphate,DUTPELISA試劑盒人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織LYNB激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPlacentaCadherin,P-cadELISAKit人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒規格:96T/48T
血清無機磷檢測試劑盒100T使用說明書人肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺表面活性物質相關蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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