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尿素(Urea)檢測試劑盒100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
尿素(Urea)檢測試劑盒100T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2
人腸微血管內皮細胞HIMEC
IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照)
HS68細胞,人男性正常細胞系 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞,RBL-1細胞 平滑肌細胞培養基SMCM
CM-H089人髂動脈內皮細胞*培養基100mL
AGS(人胃腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R051大鼠子宮頸上皮細胞*培養基100mL 人支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎成纖維細胞*培養基 100mL
P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞 MCF7(癌細胞) 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204
CCL5 Protein Human 重組人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)
SK-OV-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
人腎成纖維細胞*培養基 100mL
P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞 MCF7(癌細胞) 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204
CCL5 Protein Human 重組人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)
SK-OV-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠*結合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒 ,英文名: CBG ELISA Kit
人維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminC,VCELISAKit 96T/48T
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)免疫試劑盒 Rat regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit
英文名稱HumanFlt-3ligandELISAKit人Flt-3配體(Flt-3ligand)規格:96T/48T
動物組織細胞色素P450酶體系濃度定量檢測試劑盒20次
ELISAKitPY兔吡啶交聯物規格:48T/96T
兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat serum total complement (CH50) ELISA Kit 大鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒
HumanterminalcomplementcomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 人末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISA試劑盒人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織MET激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
尿素(Urea)檢測試劑盒100T實驗方法人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人多巴色素異構酶(DT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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