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羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法

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更新時間:2017-07-07 12:50:33瀏覽次數:238次

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羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2

氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

FSTL5 Others Human FSTL5 人細胞裂解液 (陽性對照)

TALL-104細胞,急性T淋巴細胞白血病細胞 KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株,G422細胞 人淋巴成纖維細胞裂解物HLFL

家兔皮膚細胞;DR-S1

Calu-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0054Calu-3(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
人胚肺成纖維細胞;IMR-90

FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H358 人非小細胞肺癌細胞

LX-2, 人肝星形細胞株

人臍靜脈平滑肌細胞

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基 100mL
LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚腎細胞;2V6.11

HCT-15 人結直腸腺癌細胞

SK-NEP-1人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標簽)

大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 Mouse
大鼠糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人唾液酸(SA)免疫試劑盒 Human Sialic acid,SA ELISA Kit

植物蔗糖含量測試盒 可見分光光度法 50/48

RatSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

humanInterleukin27,IL-27ELISA試劑盒人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanmyelinbasicproteinautoantibodyMBPELISAKit人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human signal transduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 人信號轉導分子7(Smad7)ELISA試劑盒

Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/anti-RA33-antibody,hnRNP/RA33ELISAKit 人異質型核糖核蛋白復合物/RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織PKCα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanPentosidineELISAKit人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒規格:96T/48T
羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法人丙型肝炎病毒(HCVELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人丙酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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