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PAGE不連續凝膠電泳緩沖液(5×)100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-10 10:04:03瀏覽次數:117次

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公司供應的PAGE不連續凝膠電泳緩沖液(5×)100ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

PAGE不連續凝膠電泳緩沖液(5×)100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
PAGE不連續凝膠電泳緩沖液(5×)100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
PAGE不連續凝膠電泳緩沖液(5×)100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

人膀胱平滑肌細胞*培養基 100mL

IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)

Hepa 1-6細胞,小鼠肝癌細胞 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0923

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

SK-Hep-1(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H135人脈絡膜微血管細胞*培養基100mL

DPYS Others Human DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人脾臟內皮細胞HSEC

非洲綠猴腎細胞(SV40轉化);COS-1 [COS1] 轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞,293細胞 QGY-7703(肝癌細胞)

人肺癌細胞;A549 [A-549]

FAS Others Mouse 小鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD8A Others Ferret 雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎系膜細胞總RNAHRMC tRNA

NCI-H520 人肺鱗癌細胞

CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2

mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓

人胚腎二倍體細胞;HEK-2 人直腸平滑肌細胞*培養基 100mL
大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人*蛋白酶HTRA1(HTRA1)免疫試劑盒 Human Serine protease HTRA1,HTRA1 ELISA kit

單寧含量試劑盒 可見分光光度法 50/48

RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISA試劑盒大鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanLymeIgGELISA試劑盒人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit人對氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
山羊雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat inducible nitric oxide synthase (iNOS) ELISA Kit 大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒

Humananti-cytomegalovirusIgGantibody,anti-CMVIgGELISAKit 人抗巨細胞病毒抗體IgG(anti-CMVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織*羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20

Humanmaturationpromotingfactor,MPFELISAKit人成熟促進因子(MPF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
PAGE不連續凝膠電泳緩沖液(5×)100ml實驗方法大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠胰高血糖素(GluELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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