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Tris-Tricine陽極緩沖液(5×,pH8.9)500ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Tris-Tricine陽極緩沖液(5×,pH8.9)500ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CXCL16 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)
人腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
F9細胞,小鼠畸胎瘤細胞 A549 [A-549](肺癌細胞) 人癌細胞;MDA-MB-453
人胚肺二倍體細胞;2BS
SK-N-SH(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0362HS 683(人腦膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2
DPP7 Others Mouse 小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠支氣管成纖維細胞*培養基 100mL
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31 mouse embryo fibroblasts DMEM培養基+10%FBS
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 SH-SY5Y(神經母細胞瘤細胞)
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎小球內皮細胞cDNAHRGEC cDNA
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
QGY-7701細胞,人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88
KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎培養基,無酚紅 500ml
大鼠*Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*/*激酶24(STK24)免疫試劑盒 Human Serine/threonine-protein kinase 24,STK24 ELISA Kit
果膠含量試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISA試劑盒大鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
humanlymphocyteantigen6complexlocusA,Ly6aELISA試劑盒人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺炎病毒IgGELISA試劑盒規格:96T/48T
山羊白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat progesterone / progesterone (PROG) ELISA Kit 大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
HumanAnti-smoothmuscleantibody,ASMAELISAKit 人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanheartfattyacidbindingprotein,h-FABPELISA試劑盒人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織*肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒20次
Humanmatrixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAKit人基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Tris-Tricine陽極緩沖液(5×,pH8.9)500ml售后服務大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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