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蛋白脫鹽柱個免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
蛋白脫鹽柱個免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白
人心室肌細胞*培養基 100mL
LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人細胞裂解液 (陽性對照)
PC-12細胞,大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) 22RV1(前列腺癌細胞) 人肝癌細胞;SMMC-7721
人虹膜色素上皮細胞RNAHIPEpiC miRNA5 μg
STO(小鼠胚成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]
DNASE1 Others Human 人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
Mv1Lu細胞,貂肺上皮細胞 人紅白細胞白血病細胞,HEL細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS4
鯉魚尾鰭細胞;YZ16
NBL1 Others Human 人 DAN 人細胞裂解液 (陽性對照)
EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人生發基質細胞總RNAHHGMC tRNA
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
SW1990細胞,人胰腺癌細胞 人胸膜瘤細胞,SMC-1細胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內皮細胞生長培養基MV2(即用型) 500ml
大鼠*抗*復合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人瞬態電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1(TrpV1)免疫試劑盒 Human TrpV1 ELISA Kit
MouseEotaxin1ELISAKit小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規格:96T/48T
RatVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA試劑盒大鼠內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanlymphotoxinα,LTAELISA試劑盒人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
humanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human acetylcholine receptor antibody (AChRab) ELISA Kit 人乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒
Humananti-toxoplasmaIgGantibody,anti-toxIgGELISAKit 人抗弓形體IgG抗體(anti-toxIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA試劑盒人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織副傷*A(SalmonellaParatyphiA)定性基因檢測試劑盒20次
HumanMatrixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血栓調節蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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