當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 透析袋,截留分子量3.5KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 實驗方法
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)
人椎間盤髓核細胞*培養基 100mL
CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照)
VERO C1008 (E6)細胞,非洲綠猴腎細胞 CHO/dhFr-(中國倉鼠二氫*還原酶缺陷細胞) 小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA
人淋巴成纖維細胞總RNAHLF tRNA
V79(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠前胃癌細胞;MFC
CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細胞)5×106cells/瓶×2
DDC Others Human 人 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人毛細胞裂解物HHDPCL
EB-3[EB3]細胞,人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細胞 人腎透明細胞腺癌細胞,786-O細胞 前脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2
SPINT2 Others Mouse 小鼠 SPINT2 / HAI2 人細胞裂解液 (陽性對照)
PIK3IP1 Others Human 人 PIK3IP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胃癌細胞;MGC-803
人直腸粘膜上皮細胞*培養基 100mL
RBL-2H3細胞,大鼠嗜堿性細胞白血病細胞 敗毒梭菌Clostridium septicum 非洲綠猴腎細胞;Vero E6
XCL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 XCL1 蛋白 (His 標簽)
PANC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1D & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)ELISA試劑盒 ,英文名: TNNT1 ELISA Kit
人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA檢測試劑盒Humandecay-acceleratingactivity,DAFELISAKit 96T/48T
大鼠髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒 Rat Myeloperoxidase,MPO ELISA kit
英文名稱RatglialfibrillaryacidicproteinELISAKit大鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit規格:96T/48T
環境傷*A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴增檢測試劑盒20次
ELISAKitTSLP人胸腺基質淋巴細胞生成素規格:48T/96T
人總*(TC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human oncostatin M (OSM) ELISA Kit 人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒
HumangranzymesB,Gzms-BELISAKit 人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor,HB-EGFELISA試劑盒規格:96T/48T
組織元素熒光定量檢測試劑盒20次
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 實驗方法大鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠糖皮質激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠糖皮質激素(Glucocorticoid)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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