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凍存細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)
人皮下脂肪細胞*培養基 100mL
IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
C2C12細胞,鼠肌原細胞 H08910(卵巢癌細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1
人主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA
ZR-75-30(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2
凍存細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
凍存細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
凍存細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基質永生化細胞)5×106cells/瓶×2
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠虹膜色素上皮細胞*培養基 100mL
U-373MG人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS
IL1B Protein Rabbit 重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白
NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人纖維環細胞HAFC
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106 肺腺癌細胞,LTEP-a-2細胞 MSCS細胞,猴的骨髓間充質干細胞
PANC-1, 人胰腺癌細胞 Human
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人受體型*蛋白磷酸酶樣N(PTPRN)免疫試劑盒 Human PTPRN ELISA Kit
MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Ratα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanpeptidylprolylisomerase(cyclophilin)-like1,PPIL1ELISAKit人肽酰脯氨酰異構酶(親環蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human Helicobacter pylori IgG (Hp-IgG) ELISA Kit 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒
Humananti-livercytosolantibodytype1,LC1ELISAKit 人抗肝細胞胞質1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA試劑盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織*S轉移酶(GSHST)總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次
Humanmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規格:96T/48T
凍存細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法大鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠上腺素(EPI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠神經營養因子4(NT-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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