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線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 11:48:24瀏覽次數:122次

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公司供應的線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標簽)

人角膜上皮細胞*培養基 100mL

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照)

HPT-8細胞,小鼠飼養層上皮細胞 293(轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184

人腦微血管內皮細胞裂解物HBMECL

EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2 大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
肝竇內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CST9L Others Human CST9L / Testatin 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠骨骼肌細胞*培養基 100mL

208F大鼠成纖維細胞 208F rat fibroblasts 大鼠成纖維細胞

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標簽)

IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小細胞肺癌細胞;NCI-H446

人胃粘膜上皮細胞*培養基 100mL

MFC細胞,小鼠胃癌細胞 BHK(幼倉鼠腎細胞) 獼猴肺細胞;MML2

XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標簽)

RBE(人膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒 ,英文名: OAS1 ELISA Kit

人*(SS)ELISA檢測試劑盒HumanSomatostatin,SSELISAKit 96T/48T

大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒 Rat hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit

CLIAKitforTSGF(HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor)ELISAKit人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子規格:48T/96T

胚胎干細胞外胚層(ectoderm)細胞分化熒光檢測試劑盒10

ELISAKitCoxV-IgM人柯薩奇病毒IgM規格:48T/96T
人壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human mucin / mucin 5B (MUC5B) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒

HumanCyclin-D2ELISAKit 人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量檢測試劑盒20

Humanlowmolecular-weightprotein/proteasomebeta-typesubunit,LMP7/PSMB9ELISAKit人低分子質量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)ELISA試劑盒規格:96T/48T
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠醌氧化還原酶1NQ01ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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