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細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 標簽)
人視網膜muller細胞*培養基 100mL
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
GH3細胞,大鼠埀體瘤細胞 5637(人膀胱癌細胞) 非洲綠猴腎細胞;Vero E6
細胞培養超純水CCGW
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
臍帶單核細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)
H9c2細胞,大鼠心肌細胞 人肝癌細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-心房總RNAHCF-aa tRNA
人大隱靜脈內皮細胞*培養基 100mL
Ana-1細胞,小鼠巨噬細胞 WEHI 22.1(B淋巴細胞) 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽)
TM3(小鼠間質細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒 Human Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit
MouseFreeTri-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
SheepInterleukin1,IL-1ELISA試劑盒綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanmannosereceptor,MRELISA試劑盒人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit人磷酸烯醇式丙同酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人標志物(CA724)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Expression of human normal T cells and secreted factor (RANTES/CCL5) ELISA Kit 人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒
HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanH-rasELISA試劑盒人H-rasELISA試劑盒規格:96T/48T
組織氧化酶活性熒光定量檢測試劑盒20次
Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
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大鼠抗*(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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