當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書
細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)
人角膜內皮細胞*培養基 100mL
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照)
B95-8細胞,產EBV的絨猴白細胞 A549(人肺腺癌細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1
*HBSS
HEL(人紅白細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 肝實質細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
骨骼肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人間充質干細胞-肝 人肌肉成纖維細胞瘤,C2C12細胞 B16(黑色素瘤細胞)
人小細胞肺癌細胞;NCI-H446
CD48 Others Mouse 小鼠 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-心室cDNAHCF-av cDNA
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1
HepG-2細胞,人肝癌細胞 上頜牙齦癌頸淋巴結轉移癌,GNM細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25110 Hepatocyte Growth MediumKIT, 肝細胞生長培養基套裝 500ml
小鼠20S-蛋白酶體(20S-PSM)ELISA試劑盒 ,英文名: 20S-PSM ELISA Kit
人生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測試劑盒HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T
大鼠抵抗素(Resistin)免疫試劑盒 Rat Resistin ELISA Kit
CLIAKitforTSGF(MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor)ELISAKIT小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子規格:48T/96T
胚胎干細胞神經細胞(neuron)定向分化試劑盒5次
ELISAKitGzms-A人顆粒酶A規格:48T/96T
人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human fat Arabia mannan (LAM) ELISA Kit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒
Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISA試劑盒人溶酶體相關膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織活化*10(FACTORXa)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanliverkidneymicrosomeautoantibody,LKMELISAKit人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
細胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書大鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。