當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書
溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
TGFA Protein Human 重組人 TGFA / TGF-alpha 蛋白
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養基 100mL
EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照)
C8-D1A細胞,鼠小腦細胞 NCI-H1755 [H1755](人肺癌細胞) 恒河猴肺細胞;RM-L1
扁桃體上皮細胞生長添加物TEpiCGS
M1(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 淋巴成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌
CSNK1G1 Others Human 人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS1
RKO細胞,結腸腺癌細胞 人鼻咽癌細胞系,SUME-a細胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA
IL34 Others Mouse 小鼠 IL-34 人細胞裂解液 (陽性對照)
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心臟成纖維細胞-心房HCF-aa
非洲綠猴腎細胞;CV-1
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細胞,QG-56細胞 E14細胞,129小鼠ES細胞
KM3, 人多發性骨髓瘤細胞 Human
CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)免疫試劑盒 Human Growth/differentiation factor 3 ELISA kit
MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規格:96T/48T
SheepInterleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanmatrixextracellularphosphoglycoprotein,MEPEELISA試劑盒人細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanphosphoglyceratemutase2,PGAM2ELISAKit人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人脂氧素A4(LXA4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human lipopolysaccharide binding protein (LBP) ELISA Kit 人脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒
Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanhydroxylysine,HylELISA試劑盒人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織肌酸激酶(CK)總活性比色法定量檢測試劑盒25次
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T
溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2/CXCL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。