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溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽)
大鼠氣管上皮細胞*培養基 100mL
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照)
CRFK細胞,貓腎細胞 SK-HEP-1(人肝癌細胞) 獼猴肺細胞;MML2
角質細胞生長添加物KGS
M14(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 顱蓋造骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]
MDA-MB-231細胞,癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7402細胞 CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
倉鼠源細胞
CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心臟成纖維細胞-心房裂解物HCF-aa L
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
AGS人胃腺癌細胞 Human
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長分化因子2(GDF2)免疫試劑盒 human growth differentiation factor 2,GDF2 ELISA Kit
Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanMatrixGlaProtein,MGPELISA試劑盒人基質γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人脂磷壁酸(LTA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human adipose differentiation related protein (ADRP) ELISA Kit 人脂肪分化相關蛋白(ADRP)ELISA試劑盒
HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanhydroxylysine,HylELISA試劑盒人羥賴氨酸(Hyl)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織肌酸激酶(CK)總活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20次
Humanlipoproteinlipase,LPLELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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