我司高爾基體蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
高爾基體蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
高爾基體蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)

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CTLA4 Ig-24細胞，中國倉鼠卵巢細胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細胞) CM-H002人肺大動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

間充質(zhì)干細胞脂肪細胞分化培養(yǎng)基MADM-prf

MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS

CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CM-M033小鼠肝實質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL

WM451, 人黑色素瘤細胞 導(dǎo)管瘤細胞,BT474細胞 VERO(非洲綠猴腎細胞)

小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6

LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
C7 Others Human 人 C7 / Complement component 7 人細胞裂解液 (陽性對照)

人心臟成纖維細胞裂解物HCFL

人腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

MES-13細胞，小鼠腎小球系膜細胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺細胞;GP-F1

EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)

BE(2)-M17(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
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