當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法
我司酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法本著標準*、質量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠肺動脈成纖維細胞*培養基 100mL
CANT1 Others Human 人 CANT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
ROS1728 大鼠成骨細胞 Osteoblasts of ROS1728 rats EMEM +10 FBS
上皮細胞培養基MEpiCM
MV3(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
T-104BII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
星形細胞生長添加物AGS
TE 354.T細胞,人皮膚基底細胞癌 人胚腎細胞,AAV-293細胞 原代單核細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
盤羊皮膚細胞;ASHS3
S100A1 Others Human 人 S100A1 人細胞裂解液 (陽性對照)
HBEGF Others Human 人 HBEGF / DTR 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人星形膠質細胞裂解物HAL
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]
HCC 94[HCC941122]細胞,子宮鱗癌細胞(高分化) 人低分化胃癌細胞,SGC7901細胞 豬腎細胞;PK(15)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫試劑盒 Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,sIL-1RⅡ ELISA kit
CLIAKitforTdT(Humanterminaldeoxynucleotidyltransferase)ELISAKit人末端脫氧核苷酸轉移酶規格:48T/96T
人體HemoglobinERFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規格:48T/96T
人脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human neutrophilic alkaline phosphatase (NAP) ELISA Kit 人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒
Humanpigmentepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISA試劑盒人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶3H同位素標記檢測試劑盒(不包括同位素)20次
HumanleukotrieneE4,LT-E4ELISAKit人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。