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蛋白酶抑制劑混合物片劑(含EDTA)10片使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(含EDTA)10片使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(含EDTA)10片使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠甲狀腺上皮細胞*培養基 100mL
FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
AML-12小鼠正常肝細胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS
小鼠小膠質細胞MM
SMC-1(人胸膜瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 胃黏膜上皮Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
RSC, 大鼠雪旺細胞
CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1
GES細胞,人腎上皮細胞 小鼠B淋巴細胞,WEHI 231細胞 CL-0454TE-11(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2
H-97(人高轉移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
hCD34+-CB-c pooled 臍帶血來源的人類造血祖細胞,混合來源 100000 人脊柱間充質干細胞HVMSC
ITGAX & ITGB2 Others Human 人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
人牙周膜成纖維細胞總RNAHPLF tRNA
KYSE410 人食管癌細胞
CL-0337FO(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
RN-h, 大鼠海馬趾神經元
人皮膚成纖維細胞;HSAS4 人胎盤絨毛膜細胞*培養基 100mL
大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 ,英文名: TPA ELISA Kit
人腎上腺素(EPI)ELISA檢測試劑盒HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 96T/48T
大鼠*酯轉移蛋白(CETP)免疫試劑盒 Rat cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit
CLIAKitforTRAP-5bELISAKit(Rabbit)兔酒石酸磷酸酶TRAP-5bELISA試劑盒規格:48T/96T
氣生蘭(epiphytic)克隆增殖培養基500毫升溶液/片劑
ELISAKitHBcAb人抗乙型肝炎病毒核心抗體規格:48T/96T
人整合素αⅤβ3(Integrin αⅤβ3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 人壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-jELISA試劑盒*j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量檢測試劑盒20次(10樣本)
HumanleukocyteantigenC,HLA-CELISAKit人類白細胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒規格:96T/48T
蛋白酶抑制劑混合物片劑(含EDTA)10片使用說明書大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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