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膜蛋白溶解液50ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
膜蛋白溶解液50ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標簽)
大鼠腸粘膜上皮細胞*培養基 100mL
ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照)
A-375人惡性黑色素瘤細胞 A-375 human malignant melanoma cells DMEM+10% FBS
人絨毛膜滋養層細胞HVT
293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經膠質細胞特制基礎培養基Many types of cells包裝:500/250/100ml
人心臟成纖維細胞總RNAHCF tRNA
CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1
SMMC-7721細胞,肝癌細胞 人羊膜細胞系,Wish細胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7
HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人羊膜上皮細胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1
CL187/CCL187細胞,人大腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,M14細胞 人多發性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]
Hela(人細胞) 5×106cells/瓶×2
ACVRL1 Others Mouse 小鼠 ALK-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠表睪酮(ET)ELISA試劑盒 ,英文名: ET ELISA Kit
人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA檢測試劑盒Humanneuronalapoptosisinhibitoryprotein,NAIPELISAKit 96T/48T
大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒 Rat soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit
英文名稱RatGRHELISAKit大鼠促生長激素釋放激素(GRH)規格:96T/48T
組分氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量檢測試劑盒50次
ELISAKitNAIP人神經元凋亡抑制蛋白規格:48T/96T
人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 4 (TRAIL-R4) ELISA Kit 大鼠壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒
Humannitricoxide,NOELISAKit 人血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumaninhibinB,INH-BELISA試劑盒人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP-3)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
膜蛋白溶解液50ml使用說明書大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠脯酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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