DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次保存詳細介紹：

DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次保存產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點: 1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開即用，十分方便，免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活，可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次保存使用方法：
一、準備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿（詳見該產品的使用手冊）。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶， 立即使用。注意：放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中）。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣（氧氣會降低聚合反應效率）。但如果實驗條件有限，此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意：即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次保存后續處理：
1. 染色觀察：將凝膠一面的玻璃板揭開，直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進行各種染色，包括銀染（固定、漂洗、顯影和定影等步驟）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后進行膠回收處理。
3. Northern 雜交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后電轉移到帶正電的尼龍膜上，然后進行雜交處理。
4. 放射自顯影：如果 miRNA 樣品電泳前經過同位素標記，則將凝膠一面的 玻璃板揭開，用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來，然后包上保 鮮膜，真空抽干，然后使膠跟 X 光片向對置進行放射自顯影。
人前列腺平滑肌細胞HPSMC

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

HUVEC 人臍靜脈血管內皮細胞

CM-H123人神經小膠質細胞*培養基100mL

PANC-1, 人胰腺癌細胞

人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145] 人小腦顆粒細胞*培養基 100mL
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人結腸平滑肌細胞HCSMC

小型豬腎細胞;MPK

H125細胞，人肺癌細胞 小鼠脂肪細胞,L13T3細胞 CM-R111大鼠雪旺氏細胞*培養基100mL

RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000ml
人結腸平滑肌細胞HCSMC

NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

小型豬腎細胞;MPK

H125細胞，人肺癌細胞 小鼠脂肪細胞,L13T3細胞 CM-R111大鼠雪旺氏細胞*培養基100mL

RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000ml
Anti-SHP-1/FITC 熒光素標記造血細胞磷酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

AT (Angiotenogen) 血管緊張素原(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

鼻咽癌細胞相關基因6抗體 Anti-NGX6 1ml

SLC39A6 英文名稱： 雌激素調節蛋白LIV1/鋅轉運蛋白抗體 0.1ml

E.coli O6 英文名稱： 大腸桿菌埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6) 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規格 0.1ml

AT (Angiotenogen) 血管緊張素原(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FEZ2 英文名稱： 椎骨蛋白2抗體 0.2ml

鼠抗人CD3單克隆抗體 Anti-CD3 0.1ml

Anti-CD304/BDCA-4/NRP-1 /FITC 熒光素標記神經纖毛蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLGF 胎盤生長因子抗體 規格 0.1ml

Anti-Annexin V/PE 熒光素PE標記兔抗人、大、小鼠、Annexin V抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次保存IL-13 小鼠白介素-13Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-phospho-MK1 (Thr286) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MTMR14 肌管素相關蛋白14抗體 規格 0.2ml

Human chemerin ELISA Kit 人chemerin 96T

SORBS2 英文名稱： 精酸結合蛋白2抗體 0.2ml

CD68 英文名稱： CD68抗體 0.1ml

Anti-phospho-MK1 (Thr286) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml