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預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸
預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g保存
DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次運輸產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點: 1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活,可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次運輸使用方法:
一、準備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產品的使用手冊)。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次運輸后續處理:
1. 染色觀察:將凝膠一面的玻璃板揭開,直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進行各種染色,包括銀染(固定、漂洗、顯影和定影等步驟)、EB(每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液)、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen(每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液)。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后進行膠回收處理。
3. Northern 雜交:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后電轉移到帶正電的尼龍膜上,然后進行雜交處理。
4. 放射自顯影:如果 miRNA 樣品電泳前經過同位素標記,則將凝膠一面的 玻璃板揭開,用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來,然后包上保 鮮膜,真空抽干,然后使膠跟 X 光片向對置進行放射自顯影。
活/死細胞染色試劑盒CSK
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7
HHCC細胞,人肝癌細胞 小鼠肺癌細胞,Lewis細胞 牦牛皮膚細胞;BMU-S1
ME-180(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-23020 Fibroblast Growth Medium 2, 成纖維細胞生長培養基2型(即用型) 500ml
RSPO3 Others Human 人 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脈絡叢內皮細胞裂解物HCPECL
CatL1 家貓肺成纖維樣細胞
CL-0086GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞)5×106cells/瓶×2
NRK-52E,大鼠腎細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM932 人臍動脈內皮細胞*培養基 100mL
人脈絡叢內皮細胞裂解物HCPECL
RSPO3 Others Human 人 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CatL1 家貓肺成纖維樣細胞
CL-0086GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞)5×106cells/瓶×2
NRK-52E,大鼠腎細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM932 人臍動脈內皮細胞*培養基 100mL
SP ELISA Kit 大鼠P物質Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ZCWCC1 ZCWCC1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fx1A 腎刷狀緣抗體 規格 0.2ml
IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子2 96T
NMDAR2B 英文名稱: 谷酸受體2B抗體 0.1ml
APOL4 英文名稱: 載脂蛋白L4抗體 0.2ml
Anti-ZCWCC1 ZCWCC1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗兔IgG 0.1ml
FUNDC1 英文名稱: X三體綜合征相關蛋白FUNDC1抗體 0.2ml
鼠抗人非受體型*激酶BTK單克隆抗體 Anti-BTK 0.1ml
Anti-Nm23-H1/FITC 熒光素標記抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PP2A beta/PPP2CB 蛋白質磷酸酶2B抗體 PP2A β PP2A-β 規格 0.1ml
Anti-XBP-1/FITC 熒光素標記細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次運輸MIP-2 小鼠巨噬細胞炎性蛋白-2Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-FADD Fas死亡結構域相關蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh M-RAS/Mras 原癌基因M-ras抗體 規格 0.1ml
VA(Human Vitamin A) ELISA Kit 人維生素A 96T
SLC30A3 英文名稱: 溶質載體鋅轉運3抗體 0.2ml
CD83 英文名稱: CD83抗體 0.1ml
Anti-FADD Fas死亡結構域相關蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
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