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核酸印跡膜染液100mL保存

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更新時間:2017-07-17 12:39:22瀏覽次數:118次

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核酸印跡膜染液100mL保存一般使用 0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

核酸印跡膜染液100mL保存使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37
反應 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
核酸印跡膜染液100mL保存詳細說明書:

核酸印跡膜染液100mL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
核酸印跡膜染液100mL保存步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發生遺漏、污染工作環境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)ELISA試劑盒 ,英文名: ADH1 ELISA Kit

Mouse terminal complement complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒

MouseStromalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAkit 小鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit人降解加速因子規格:48T/96T

細胞Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

PPAR-γ大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規格:48T/96T
小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP1)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP1 ELISA Kit

人血纖蛋白(Fibrin)ELISA檢測試劑盒HumanFibrinELISAKit 96T/48T

大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-)免疫試劑盒 Rat annexin ,ANX- ELISA Kit

英文名稱RatPPAR-γELISAKit大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit規格:96T/48T

酵母菌*補充混合(CSM-BRENT)培養基100毫升

ELISAKitTREM-1人髓系細胞觸發受體-1規格:48T/96T
小鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human adrenal cortex antibody (ACA) ELISA Kit 人腎上腺皮質抗體(ACA)ELISA試劑盒

humanAnti-thyroid-globulinantibody,ATGAELISAKIT 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humananti-OJ-antibodyOJ/IleRSELISA試劑盒人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物維生素B1高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

humanubiquitinD,UBDELISAKit人泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒規格:96T/48T
5S-HETrE 50 ug     5S-xy7noxy-6E8Z11Z-eicosatrienoic acid 5S-HETrE

Kuromanin chloride 500 ug     Chrysontemin|Cyanidin 3-O-β-glucopyranoside 2-

mFluor Red 700-標記鏈霉親和素偶聯物 1 mg/ml     mFluor Red 700-streptavidin conjugate 1 mg/ml

4-metxyl Erlotinib 5 mg     N-3-ethynyl-4-metxylpxenyl-67-bis2-metxoxyethoxy-4-inoneazolinamine 4-metxyl Erlotinib

Docosapentaenoic Acid 100 mg     7Z10Z13Z16Z19Z-docosapentaenoic acid Docosapentaenoic Acid

D-     Ampicillin wo7ium
Gluten Exorphin CTyr-Pro-Ile-Ser-Leu

α-Bag Cell Peptide (1-9)Ala-Pro-Arg-Leu-Arg-Phe-Tyr-Ser-Leu

[Lys4] Sarafotoxin S6cCys-Thr-Cys-Lys-Asp-Met-Thr-Asp-Glu-Glu-Cys-Leu-Asn-Phe-Cys-His-Gln-Asp-Val-Ile-Trp (Disulfide bridge: Cys1-Cys15, Cys3- Cys11)

Biotin-Galanin, humanBiotin-Gly-Trp-Thr-Leu-Asn-Ser-Ala-Gly-Tyr-Leu-Leu-Gly-Pro-His-Ala-Val-Gly-Asn-His-Arg-Ser-Phe-Ser-Asp-Lys-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser

Osteostatin (human)Thr-Arg-Ser-Ala-Trp-Leu-Asp-Ser-Gly-Val-Thr-Gly-Ser-Gly-Leu-Glu-Gly-Asp-His-Leu-Ser-Asp-Thr-Ser-Thr-Thr-Ser-Leu-Glu-Leu-Asp-Ser-Arg
核酸印跡膜染液100mL保存派啶pipeni7ineAR100mL

CA1161-500g丙烯酰胺1979-6-1500g0

C6885-100MGCollagenase 膠原酶Ⅱ--100mg

糞便DNA提取試劑盒50T

L-阿拉伯糖10g

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