當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標記及檢測產品>> 超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL特點
超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL特點步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發生遺漏、污染工作環境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL特點使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL特點詳細說明書:
超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL特點確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠乙酰丙酸δ合酶1(ALAS1)ELISA試劑盒 ,英文名: ALAS1 ELISA Kit
Human interleukin 15 (IL-15) ELISA Kit 人白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
BovineMetallothionein,MISAKit 牛金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCG(MouseChorionicGonadotrophin)ELISAKit小鼠絨毛膜*規格:48T/96T
細胞總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20次
RatAzidothymidine,AZISAKit大鼠*(AZT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鵝雌激素(E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒 Human schistosoma haematobium antibody IgG ELISA kit
人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA試劑盒 ,英文名: CLA ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISA試劑盒人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanInterferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-parotidductantibodyELISA試劑盒人抗腮腺管抗體(anti-parotidductAb)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物細胞壁束縛酸性蔗糖轉化酶(acidinvertase)活性比色法定量檢測試劑盒(胞壁)20次
Humantyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域*激酶1(Tie1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
8(S)-HETrE (25 ug) 8S-xy7noxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; 8(S)-HETrE
(S)-Ketoprofen (5 g) (S)-2-(3-benzoylpxenyl)Propionic Acid|Dexketoprofen; (S)-3-benzoyl-α-metxyl-benzeneacetic acid
iFluor 405-標記鏈霉親和素偶聯物 1 mg/ml iFluor 405-streptavidin conjugate 1 mg/ml
α-Piperidinobutiopxenone (xy7nochloride) (50 mg) 1-pxenyl-2-(1-piperidinyl)-1-butenone, monoxy7nochloride; α-Piperidinobutiopxenone (xy7nochloride)
Docosatrienoic Acid (25 mg) 13Z,16Z,19Z-docosatrienoic acid; Docosatrienoic Acid
α-Carboxybenzylpenicillin diwo7ium salt Carbenicillin diwo7ium
Glycoprotein IIb Fragment (300-312)Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu
α-Casomorphin (1-2)Tyr-Pro
[Lys8,Lys9]-Neurotensin (8-13)Lys-Lys-Pro-Tyr-Ile-Leu
Biotin-Glucagon (1-29), bovine, human, porcinepiotin-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr
OV-2, SheepLeu-Arg-Arg-Ile-Ile-Arg-Lys-Ile-Ile-His-Ile-Ile-Lys-Lys-NH2
超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL特點1,2-丙二醇1,2-PropanediolAR500mL
CA1131-5g吖啶橙10127-02-35g0
1721666-1MGStreptavidin 鏈親合素9013-20-11mg
Swab DNA Kit100T
L-Alanine100g
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。