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酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點

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更新時間:2017-07-17 12:42:26瀏覽次數:215次

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酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點詳細說明書:

酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37
反應 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發生遺漏、污染工作環境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙酰*轉移酶(CHAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人信號識別顆粒抗體(SRP)免疫試劑盒 Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit

檸檬酸合酶(CS)測試盒 可見分光光度法 10/9

Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規格:96T/48T

humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
3β羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒 Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit

人抗肌聯蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒 ,英文名: TTN ELISA Kit

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T

humangastriccarcinomaMarkerELISA試劑盒人胃癌標志物ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanInterferonαAntibody,IFNα-AbELISAKit人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit 大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒

Human50%complementhemolysis,CH50ELISAKit 人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humananti-prothrombinsantibodies,aPT1/aPT2ELISA試劑盒人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10

Humantumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,TRAIL-R4ELISAKit人壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
11R-HEDE 25 ug     11R-xy7noxy-12E14Z-eicosadienoic acid 11R-HEDE

β-Nicotinamide Mononucleotide 50 mg     β-NMN 3-aminocarbonyl-1-5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl-pyridinium, inner salt

iFluor 680-標記鏈霉親和素偶聯物 1 mg/ml     iFluor 680-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Pentadecanoyl Ethanolamide 50 mg     N-2-xy7noxyetxyl-pentadec* Pentadecanoyl Ethanolamide

5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid 5 mg     5Z8Z11Z-eicosatrienoic acid Mead Acid 5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid

N-Acetyl-5-metxoxytryptamine NSC 113928 Regulin NSC 56423     Melatonin
gp100 (177-186)Ala-Met-Leu-Gly-Thr-His-Thr-Met-Glu-Val

α-Conotoxin EIArg-Asp-Hyp-Cys-Cys-Tyr-His-Pro-Thr-Cys-Asn-Met-Ser-Asn-Pro-Gln-Ile-Cys- NH2

[Met5,Arg6,7,Val8,Gly9] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Arg-Val-Gly

Biotin-Kinase Domain of Insulin Receptor (2)Biotin-Thr-Arg-Asp-Ile-pTyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys

P38 (411-425), M. lepraeAla-Gly-Gly-Gly-Val-Thr-Leu-Leu-Gln-Ala-Ala-Pro-Ala-Leu-Asp
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL特點2,2-聯比啶2,2'-DipyridylAR1g

CA1021-1gABTS(2,2-連氮基--(3-乙基本并二氫噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽)30931-67-01g0

P7125-10GProtein A *A

病毒DNA-RNA純化試劑盒50T

L-Ascorbic Acid100g

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