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AP 標記的抗*抗體10μL特點

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更新時間:2017-07-17 12:50:09瀏覽次數:232次

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AP 標記的抗*抗體10μL特點一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

AP 標記的抗*抗體10μL特點詳細說明書:

AP 標記的抗*抗體10μL特點使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37
反應 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
AP 標記的抗*抗體10μL特點確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
AP 標記的抗*抗體10μL特點步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發生遺漏、污染工作環境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)免疫試劑盒 Human thymus independent antigen,TI-Ag ELISA Kit

乳酸脫氫酶(LDH)測試盒 可見分光光度法 50/24

RatLuteinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humangrowth-regulatedoncogeneα/melanomagrowthstimulatingactivity,GROα/MGSAELISA試劑盒人生長調節致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
大鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血紅蛋白α亞基(HB-α)免疫試劑盒 Human α-subunits of hemoglobin,HB-α ELISA Kit

人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 ,英文名: ANA ELISA Kit

RatInterleukin10,IL-10ELISA試劑盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA試劑盒人*酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanInterleukin2IL-2ELISAKit人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠肝炎病毒抗體(HV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human decay accelerating factor (DAF/CD55) ELISA Kit 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA試劑盒

HumanTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAnti-titinAntibody,TTNELISA試劑盒人抗肌聯蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物氧化型*(GSSG)濃度熒光定量檢測試劑盒50

Humantransforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit人轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T
13R-HODE 25 ug     13R-xy7noxy-9Z11E-octadecadienoic acid 13R-HODE

CUDC-101 25 mg     7-[[4-[3-ethynylpxenylamino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*

Quest Fluo-8 鉀鹽     Quest Fluo-8 potewwium salt

Oxandrolone 1 mg     4bS7S9aS9bR11aS-tetradecaxy7no-7-xy7noxy-4aS6aS7-trimetxyl-cyclopenta[56]naphtho[12-c]pyran-21H-one Anavar|NSC 67068|Oxandrin|SC 11585 Oxandrolone

Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxyetxyl-8Z11Z14Z-eicosatrienamide Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide

Benzylpenicillin potewwium salt     Penicillin G potewwium USP
GRP (1-16) (porcine)Ala-Pro-Val-Ser-Val-Gly-Gly-Gly-Thr-Val-Leu-Ala-Lys-Met-Tyr-Pro

β- Amyloid (1-34)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu

[Phe22] Big Endothelin-1 (19-37), humanIle-Ile-Trp-Phe-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-Ser-Pro-Arg

BNP-26 (porcine)Asp-Ser-Gly-Cys-Phe-Gly-Arg-Arg-Leu-Asp-Arg-Ile-Gly-Ser-Leu-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Val-Leu-Arg-Arg-Tyr (Disulfide bridge:Cys4-Cys5)

PAKtideArg-Arg-Arg-Leu-Ser-Phe-Ala-Glu-Pro-Gly
AP 標記的抗*抗體10μL特點1,2-二錄本1,2-DichlorobenzeneCP500mL

MD25-14透析袋(半周長25mm,直徑16mm,截留分子量14000Da) 5/0

D0555-100mgGDP,Diwo7ium Salt 5’二磷酸鳥苷二鈉7415-69-2100mg

DNA Marker I250ul

Linolenic Acid5g

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