當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標記及檢測產品>> HRP 標記的抗*抗體10μL保存
HRP 標記的抗*抗體10μL保存步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發生遺漏、污染工作環境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
HRP 標記的抗*抗體10μL保存使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
HRP 標記的抗*抗體10μL保存詳細說明書:
HRP 標記的抗*抗體10μL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: Hp-IgG ELISA Kit
人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA檢測試劑盒HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISAKit 96T/48T
大鼠白介素13(IL-13)免疫試劑盒 Rat Interleukin 13,IL-13 ELISA KIT
CLIAKitforTAT(Mousethrombin-antithrombincomplex)ELISAKit小鼠*抗*復合物規格:48T/96T
人體IL-23基因甲基化檢測試劑盒20次
ELISAKitANF人抗核因子抗體規格:48T/96T
大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅蛋白H(HbH)免疫試劑盒 Human Hemoglobin H,HbH ELISA Kit
人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒 ,英文名: ASA ELISA Kit
RatInterleukin11,IL-11ELISA試劑盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanglomerularbasementmembraneantibogy,GBMELISA試劑盒人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanInterleukin2,IL-2ELISAKit人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠肝炎病毒(MHV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 人雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
Humansolubleplaetendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit 人可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-toxoplasmaIgGantibody,anti-toxIgGELISA試劑盒人抗弓形體IgM抗體(anti-toxIgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物氧化應激活性氧(ROS)比色法測定試劑盒(單線態氧氣)20次
Humantransferrinreceptor,TFRELISAKit人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒規格:96T/48T
13(R)-HODE (50 ug) 13R-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(R)-HODE
CUDC-101 (5 mg) 7-[[4-[(3-ethynylpxenyl)amino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*
Cal-520, AM Cal-520, AM
Oxandrolone (10 mg) (4bS,7S,9aS,9bR,11aS)-tetradecaxy7no-7-xy7noxy-4aS,6aS,7-trimetxyl-cyclopenta[5,6]naphtho[1,2-c]pyran-2(1H)-one; Anavar|NSC 67068|Oxandrin|SC 11585; Oxandrolone
Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-8Z,11Z,14Z-eicosatrienamide; Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide
Benzylpenicillin potewwium salt Penicillin G potewwium, USP
GRP (14-27) (human, porcine, canine)Met-Tyr-Pro-Arg-Gly-Asn-His-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2
β- Amyloid (1-37)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly
[Phe4]-Dermorphin (1-4) amideTyr-D-Ala-Phe-Phe-NH2
BNP-32 ,porcineSer-Pro-Lys-Thr-Met-Arg-Asp-Ser-Gly-Cys-Phe-Gly-Arg-Arg-Leu-Asp-Arg-Ile-Gly-Ser-Leu-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Val-Leu-Arg-Arg-Tyr (Disulfide bridge:Cys10-Cys26)
Pancreastatin, porcineGly-Trp-Pro-Gln-Ala-Pro-Ala-Met-Asp-Gly-Ala-Gly-Lys-Thr-Gly-Ala-Glu-Glu-Ala-Gln-Pro-Pro-Glu-Gly-Lys-Gly-Ala-Arg-Glu-His-Ser-Arg-Gln-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Thr-Ala-Gly-Ala-Pro-Gln-Gly-Leu-Phe-Arg-Gly-NH2
HRP 標記的抗*抗體10μL保存叔戊醇t-pentylalcoholCP500mL
MD7-14透析袋(半周長7mm,直徑4mm,截留分子量14000Da) 250英尺(76.2米)0
CL356-5GCurdlan 凝膠多糖54724-00-4 5g
DNA Marker I250ul*5
脂多糖10mg
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