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可保種型藍白 T 載體50ng*

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更新時間:2017-07-18 12:37:30瀏覽次數:175次

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可保種型藍白 T 載體50ng*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統中同源重組的菌株,用于產生重組 Bacmid。使用 pUC19 質粒檢測,本產品轉化效率可達 107CFU/μg。

可保種型藍白 T 載體50ng*規格及成分:

可保種型藍白 T 載體50ng*產品及特點:
本產品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統中同源重組的菌株,用于產生重組 Bacmid。使用 pUC19 質粒檢測,本產品轉化效率可達 107CFU/μg DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復制子、*抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質粒包含 tns ABCD 區域,該區域提供了 mini-Tn7 從供體質粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉座蛋白。供體如 pFastBac 系列質粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當含有靶基因 pFastBac 的重組質粒轉化到 DH10Bac 細胞后,發生重組后就可產生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉染昆蟲細胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產物可以實現β-半乳糖苷酶的α-互補現象,用于重組 bacmid 的藍白斑篩選。
可保種型藍白 T 載體50ng*詳細說明書:

可保種型藍白 T 載體50ng*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin7 μ g/mL gentamicin10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態細胞為例。
3. 待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養 4 小時。
6. SOC 培養基進行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3
7. 100 μL 的各個梯度的培養物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽) Protein

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

神經營養因子3(NT3)重組蛋白 Recombinant Neurotrophin 3 (NT3)

GZMH重組人 Granzyme H 蛋白 (His 標簽) Protein

KREMEN1重組人 KREMEN1 蛋白 (His 標簽) Protein

VNN1 Protein Human 重組人 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (His 標簽)
C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 (His 標簽)

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽) Protein
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