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可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL*

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更新時(shí)間:2017-07-18 13:54:47瀏覽次數(shù):216次

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可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲(chóng)病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲(chóng)病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL*詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL*規(guī)格及成分:

可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin7 μ g/mL gentamicin10 μg/mL tetracycline100 μg/mL X-gal40 μg/mL IPTG
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋?zhuān)绶殖?/span> 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3
7. 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。
THBD重組大鼠 Thrombomodulin / THBD 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子(多肽)

SCGB1A1重組人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

KLK6 Protein Human 重組人 KLK6 / Kallikrein 6 / Neurosin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

抗增生抗體靶分子1(TAPA1)重組蛋白 Recombinant Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1)

C2重組人 C2 / Complement Component 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

NTF3重組人 NTF3 / Neurotrophin 3 蛋白 Protein

CEACAM5 Protein Human 重組人 CEACAM5 / CD66e 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子(多肽)

KLK6 Protein Human 重組人 KLK6 / Kallikrein 6 / Neurosin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

THBD重組大鼠 Thrombomodulin / THBD 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SCGB1A1重組人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠*原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶(TPX)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50/48

Ratmatrixmetalloproteinase7,MMP-7ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanHemolyticcomplement,HcELISA試劑盒人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancatecholamine,CAELISA試劑盒人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系基因檢測(cè)試劑盒20

humansimilartoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類(lèi)似RIKENcDNA2610307008基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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